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细胞划痕实验
发布日期:2012/9/17
细胞划痕实验材料:6孔板marker笔直尺20微升枪头(灭菌)无血清培养基PBS准备:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)流程:1、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2、在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。3、第二天用枪头比着直尺,..
人表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒操作全过程
发布日期:2012/9/13
人表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒操作全过程实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人表皮生长因子(EGF)水平。用纯化的人表皮生长因子(EGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入表皮生长因子(EGF)再与HRP标记的羊抗人抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成..
羊衣原体病酶ELISA试剂盒使用说明书
发布日期:2012/9/5
v\:* {behavior:url(#default#VML);}o\:* {behavior:url(#default#VML);}w\:* {behavior:url(#default#VML);}.shape {behavior:url(#default#VML);}羊衣原体病酶ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: &nb..
ELISA试剂盒操作流程
发布日期:2012/8/30
一、 ELISA试剂盒操作流程: 1. 根据需要,将若干孔德条带放置在支架上;2. 将标本、阴性质控、阳性质控以及标准品作 1:200 稀释(将5μl样品加稀 释液稀释到 1ml,混匀) ;3. 取 100μl 已稀释的血清样品、标准品和阴性质控、阳性质控加入相应得孔板 内(质控和标准品至少需做两孔) ,A1 孔不加液体作为空白底色;4. 在 37℃温箱中放置 30 分钟;5. 到时间..
酶联免疫吸附实验(ELISA)
发布日期:2012/8/23
酶联免疫吸附实验(ELISA)酶免疫测定是将抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用相结合,发展建立一种非放射性标记免疫分析方法。由于ELISA具有灵敏度高、特异性强,酶免 疫试剂的性质比较稳定,操作方法简便快速、无放射性污染以及应用范围广等很多优点,在医学基础理论研究,临床病毒学和生物化学检验等工作中应用十分广泛。该法需将纯化的抗原包被在固相载体,与一定稀释度的待侧血清反应,然后与酶标记的第二..
人Toll样受体4(TLR4)ELISA试剂盒操作全过程
发布日期:2012/8/16
人Toll样受体4(TLR4)ELISA试剂盒本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,细胞上清及相关液体样本中Toll样受体4(TLR4)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Toll样受体4(TLR4)水平。用纯化的人Toll样受体4(TLR4)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入..
酶联免疫法-猪表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒
发布日期:2012/8/14
v\:* {behavior:url(#default#VML);}o\:* {behavior:url(#default#VML);}w\:* {behavior:url(#default#VML);}.shape {behavior:url(#default#VML);}Normal07.8 磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4st1\:*{..
精原干细胞可体外转分化成卵细胞
发布日期:2012/8/9
精原干细胞可体外转分化成卵细胞ELISA试剂盒报道:上海交通大学医学院冯立新研究组新近研究发现精原干细胞可以被诱导形成卵细胞。在正常发育过程中,由上胚层细胞来源的原始生殖祖细胞(primordial germ cells, PGCs) 是精原干细胞和卵母细胞的共同前体细胞。 以往的研究发现在一定的培养条件下,精原干细胞可被诱导成具有多能性的干细胞。而另一研究显示具有多能性的胚胎干细胞可分化发育成P..
上海大鼠雌二醇ELISA试剂盒使用说明书
发布日期:2012/8/3
大鼠雌二醇ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: &nbs..
酶的底物
发布日期:2012/8/2
HRP的底物HRP催化过氧化物的氧化反应,最具代表性的过氧化物为H2O2,其反应式如下:DH2+ H2O2 D+ H2O上式中,DH2为供氧体,H2O2 为受氢体。在ELISA中,DH2一般为无色化合物,经酶作用后成为有色的产物,以便作比色测定。常用的供氢体有邻苯二胺(O- phenylenediamine, OPD)、四甲基联苯胺(3,3',5,5'-tetramethylbenzidine, ..
ELISA原理与分类
ELISA原理与分类1. ELISA试剂盒原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原 或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用 洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过..
ELISA竞争法操作步骤
发布日期:2012/8/1
ELISA竞争法操作步骤竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合,因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量成反比。操作步骤如下:(1)将特异抗体与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤。(2)待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液,使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原,则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原,则与酶标抗原以同样的..
ELISA加样步骤
发布日期:2012/7/31
ELISA加样◎加样应用微量移液器(加样枪)按规定的量加入微孔板的1/3处避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。◎每次加样应更换吸嘴,做到一人一吸头,以免发生交叉污染;干吸头预先在血清中抽吸三次。◎样本稀释,目的是为了减少非特异性反应,所以一定要先加稀释液后加样本,特别注意加样后要在微量振荡器上振荡30秒钟,同时注 意防止液体溢出。如后面操作步骤中加二种以上试剂时均需振荡混匀。 ◎如用滴..
elisa试剂盒标本采集和保存
发布日期:2012/7/30
elisa试剂盒标本采集和保存◎可用作 ELISA的标本十分广泛,体液(如血清,血浆,各种积液),分泌物(如唾液)和排泻物(如粪便,尿液)均可作为标本以测定其中 的抗原或抗体成分,一般使用血清。n 标本采集时应尽量避免溶血,因红细胞破裂可释放过氧化物酶活性物质干扰立可读方法的结果,可造成假阳性;长菌的标本同样的道理易 产生假阳性。◎抗凝不完全的标本因纤维蛋白..
酶联免疫吸附测定(ELISA)操作要点
发布日期:2012/7/27
酶联免疫吸附测定(ELISA)操作要点1 标本的采取和保存 可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗..
ELISA的概念、原理、操作步骤
ELISA试剂盒概念、原理、操作步骤ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 (一) 原理 ELISA是以免疫..
ELISA试剂盒评价
发布日期:2012/7/26
ELISA试剂盒评价◎试剂评价需要有权威的血清考核盘( Panel)进行检测,一般实验室不易从生检所或临检中心取得,每进一次试剂评价一次也很麻烦。可以通过间接的信息对试剂进行选 择。◎根据该试剂生检所批批检定报告,了解其质量水平,按照质量计划选择灵敏度高的或特异性高的试剂;◎通过询问试剂包被物的组成,如原料来源(基因工程或合成多肽),片段的组合(按比例混合或化学合成),片段的长短等判断试剂的 优劣..
ELISA试剂盒选择
ELISA试剂盒选择◎卫生部规定乙肝试剂,丙肝试剂,艾滋病试剂,梅毒试剂及血型试剂必须使用经卫生部生物制品检定所检定合格,并贴有防伪标签的产 品,试剂应从灵敏度,特异性,精密度,稳定性,简便性,安全性及经济性作出全面的评价。◎灵敏度:有二层含义,1)为试剂检出被检物质的最低量的能力;2)为试剂对人群或大量样品中阳性检出的能力(假阴性越少越好) ,取决于包被物的全面性。◎特异性:指试剂正确检定不存在..
ELISA今后的发展方向
发布日期:2012/7/25
ELISA试剂盒原理●根据检测目的和操作步骤不同有三种基本方法。●双抗体(原)夹心法 检测抗原(体)的常见方法,应用针对抗原两个不同决定族的两种单抗分别作为固相载 体和酶标抗体检测溶液中的抗原(适用于二价以上抗原,不能测小分子半抗原)。 ●间接法 检测抗体的方法,利用酶标记的抗抗体(第二抗体)检测已与固相抗原结合的抗体。 ●..
ELISA技术中的抗原与抗体的反应
ELISA技术中的抗原与抗体的反应ELISA试剂盒抗体1.2.1 抗体的结构抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白 (immunoglobulin,Ig)。Ig分五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与免疫测定有关的Ig主要为 IgG和IgM。Ig由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig的轻链是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda )两..
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