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ELISA今后的发展方向

阅读次数:760发布时间:2012/7/25 9:16:28

ELISA试剂盒原理
●根据检测目的和操作步骤不同有三种基本方法。
●双抗体(原)夹心法  检测抗原(体)的常见方法,应用针对抗原两个不同决定族的两种单抗分别作为固相载 体和酶标抗体检测溶液中的抗原(适用于二价以上抗原,不能测小分子半抗原)。 
●间接法  检测抗体的方法,利用酶标记的抗抗体(第二抗体)检测已与固相抗原结合的抗体。
 
●竞争法  检测抗原或小分子半抗原、抗体,以测抗原为例,使待测抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合,结果 如待测抗原含量越多,与固相抗体结合的酶标抗原就越少,显色越浅,二者呈负相关。

ELISA原理
今后的发展方向
●聚苯乙烯表面的高级制备。已有的技术是酰肼化(聚二氟乙叉,PVDF);生物素化;预包被多聚赖氨酸等,均是专利产品。
●酶促信号放大的改变,如酶促荧光、酶促化学发光等。

ELISA临床意义
●各型肝炎的特征及标志物
乙肝二对半的模式及临床意义
HBsAg  HBeAg  HBcAb-IgG   HBcAg-IgM   HBeAb    HBsAb    ;    临床意义
+    +          -    -    -    急性HBV感染早期HBV复制活跃
+    +    +     +    -    -    急慢性HBV感染,HBV复制活跃
+    -    +     +    -    -    急慢性HBV感染,HBV复制中跃
+    -    +     +    +    -    急慢性HBV感染,HBV复制低跃

+    -    +     -    +    -    HBV复制停止或极低
-    -    +     +    -    -    平静的HBV携带状态,HbsAg

-    -    +     -    -    -    HBV既往感染,未产生抗-HBs
-
    -    +     +    +    -    抗HBs出现前期,HBV复制低

-    -    +      -    +    +    HBV感染恢复期
-    -    +      -    -    +    HBV感染恢复期
+    +    +     +    -    +    不同亚型HBV再感染
+    -    -      -    -    -    HBV-DNA整合
-    -    -      -    -    +   病后或接种疫苗后获得免疫 


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