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劲马生物|多了解一些,才能更好地使用Elisa试剂盒

阅读次数:526发布时间:2022/5/31 16:38:28

以人白介素18(IL-18)为例,Elisa试剂盒用于人血清、血浆及相关液体样本中白介素18(IL-18)的测定。采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人白介素18(IL-18)的水平。向预先包被了人白介素18(IL-18)单克隆抗体的酶标孔中加入白介素18(IL-18),温育;温育后,加入标记的抗白介素18(IL-18) 抗体,再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅与样品中人白介素18(IL-18)的浓度呈正相关。
 
Elisa试剂盒的使用须知:
 
1.分析前质控
① 特色 :在固相外表组装免疫活性物质形成“免疫吸附剂”;
 
② 酶标记免疫活性物质,进行信号扩大;
 
③ 有二步温育反应二次洗涤过程;
 
④ 灵敏度特异性相对较高;
 
⑤ 局限性:只能检测到ng;
 
⑥ 精密度差(批内CV15-20%);
 
⑦ 线性规模窄(一个数量级);
 
⑧ 存在"HD-HOOK"效应。
 
 
2.试验检测人员需经过培训,把握这几方面的技术知识:
① 检验项目的基本原理;
 
② 实验意义;
 
③ 熟悉检测技巧,了解易出差错的环节及难点;
 
④ 熟悉检测试剂功能(包括试剂盒组成,包被片段及其组成);
 
⑤ 熟悉检测仪器的原理及功能;
 
⑥ 把握数据处理的能力和质量操控知识;
 
⑦ 某些特别项目的检测如抗HIV等需经有关部门组织的专门培训班,考试合格后持证上岗。
 
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