热线电话:13817140470

技术文章 当前位置:首页 > 技术文章 > ELISA法评价肠道免疫功能

TECHNICAL

ELISA法评价肠道免疫功能

阅读次数:385发布时间:2022/9/20 14:43:55

ELISA 法评价肠道免疫功能是通过检测不同炎症蛋白如急性期炎症蛋白 MPO,血清淀粉样蛋白 SAA 或细胞因子如 IL-6,IL-1b 等的表达水平。

器材:
组织匀浆器、酶标板、酶标仪。
 
试剂:
 ① 组织裂解液(200 mmol/L NaCl,5 mmol/L EDTA,10 mmol/L Tris,10% glycine,1 mmol/L PMSF,1 mg/ml Leupeptide,28 mg/ml aprotinin;pH7.4);
 ② PBS 缓冲液;
 ③ BCA 蛋白浓度检测试剂。
 ④ ELISA 试剂盒

步骤
ELISA 法评价肠道免疫功能的基本过程可分为如下几步,以检测急性期炎症蛋白 MPO 为例:
 A 取出目的肠道组织,在冰冷的 PBS 中纵向剪开,小心洗去腔内的消化液,在平板纸上吸去多余液体。
 B 10 ml 圆底离心管中加入 1~2 ml 组织裂解液和漂洗后的肠组织,在冰浴状态下匀浆 30 秒。
 C 冰上孵育 10 分钟,全部转移 1.5 ml EP 管中,4 ℃ 离心 15 分钟,转速 12000 r/min。
 D 小心分离上清,使用 BCA 法测定蛋白浓度。
 E 测定浓度后的上清分装后 - 80℃ 保存或冰上等待,立刻用于 ELISA 检测。
 F 根据 ELISA 试剂盒配备的标准实验步骤进行 MPO 的水平检测。如下图所示
上海劲马作为试剂行业的遥遥领先者,不但为您提供最新的科研资讯更为您提供优质的科研试剂(大鼠elisa试剂盒、小鼠elisa试剂盒、人elisa试剂盒、胎牛血清、标准品等),本公司所售产品均以价格适中、发货快、品质优等优势,获得众多科研朋友的青睐和支持。欢迎更多的科研朋友踊跃加入我们!
 

原创作者:上海劲马实验设备有限公司

相关产品

产品展示
PRODUCT SHOW
ICP备案号:沪ICP备15015681号-6    技术支持: 阿仪网
在线客服
热线电话

13817140470
13296071817


微信扫一扫 打开手机版
返回顶部返回顶部