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上海劲马生物为您解析:小分子抗体的组成要素

阅读次数:1277发布时间:2012/6/26 9:37:24

        上海劲马生物为您解析:小分子抗体的组成要素
  分子抗体包括抗原结合片段(fragmentofantigenbinding,Fab),可变区片段(fragment Of variable,Fv),单链可变区片段(single chain fragment Of variable,ScFv)和单区抗体(singledomainantibody,SdAb)等。

 

    (一)Fab

    Fab片段由H链Pd段和完整L链通过二硫键形成的异二聚体,仅含一个抗原结合位点。用木瓜水解酶消化抗体可获得2个Fab片段。在Fab基因表达时,5端带上细菌蛋白信号肽基因的Fd基因和L链基因,可在大肠杆菌细胞壁的周质腔内分泌型表达,形成完整的立体折叠和链内、链间二硫键,保持Fab片段的功能。

    Fv是由L链和H链V区组成的单价小分子,是与抗原结合的最小功能片段。在Fv的基因工程技术中,可以分别构建含VH和VI。基因的载体,共转染细胞,使之各自表达后组装成功能性Fv分子;或者载体中的VH和VL之间设置终止码,分别表达2个小分子片段。H链和L链的V区可由非共价键结合在一起形成Fv,并能保持特异结合抗原的能力。

    (三)ScFv

    用适当的寡核苷酸接头将L链和H链的V区连接起来,使之形成单一的多肽链,称为单链抗体(single chainFv,ScFv)。多肽链能自发折叠成天然构象,保持Fv的特异性和亲和力,它的稳定性大大提高了。ScFv中连接DNA(1inkerDNA)的设计原则是DNA接头编码的氨基酸不干扰VH和VL的立体构象和妨碍抗原结合部位,其氨基酸组成应当为亲水性和侧链少,便于折叠和减少抗原性。一般由丝氨酸组成(Gly4Ser)n,它的长度至少含10个氨基酸残基,通常是14或15个氨基酸残基。ScFv的优点是分子量小,免疫原性弱,渗透力强,并可用于药物导向、中和毒素等功能。缺点是无抗体C区,不能介导抗体的其他生物学效应。

    (四)SdAb

    根据抗体分子的结构,一般将Fv称作抗体的最小单位,但有些更小的亚单位仍具有结合抗原的能力。如单独重链可变区仍可保留与抗原结合的能力,而且保持了完整抗体的特异性,称为单区抗体,它的亲和力低于完整的Fv。单区抗体大小只有完整IgG分子的1/12,故更容易穿入细胞,到达完整抗体不能接近的部位。单区抗体有望作为具有抗原特异性的基本单位,用来构建有效应功能和结合亲和性的抗体。

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原创作者:上海劲马实验设备有限公司

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