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人抗缪勒氏管激素检测试剂盒详细说明

阅读次数：2118发布时间：2012/6/25 15:06:58

人抗缪勒氏管激素(AMH)检测试剂盒美国DSL进口，试剂盒价格 2600元一盒

【临床意义】缪勒氏管抑制物(MIS)，也叫做抗缪勒氏管激素(AMH)，是由两个72kDa的单体通过二硫键连接构成的二聚体糖蛋白。MIS/AMH属于转化生长因子-β(TGF-β)超家族，该家族包括TGF-β、抑制素和激活素糖蛋白等。这个家族所有的成员都是二聚体糖蛋白，都与调节组织生长与分化有关。人类的MIS/AMH基因编码有一定的序列而且是孤立的，位于19号染色体短臂上。MIS/AMH的特异性受体也是独特的，具有特异性。在男性，MIS/AMH由睾丸支持细胞产生，而在女性，MIS/AMH由卵巢颗粒细胞产生。在男性的胚胎发育期，睾丸支持细胞分泌的MIS/AMH促使缪勒氏管衰退，因此维持了男性生殖管道的正常发育。在女性，缪勒氏管是子宫、输卵管、阴道上段的胚胎原基。在男性，睾丸支持细胞从胚胎形成期开始分泌MIS/AMH，此后贯彻终生。青春期后，MIS/AMH的水平缓慢下降到一个相对较低的值。在女性，血清MIS/AMH的水平非常低，直到青春期才增高。直到更年期，循环MIS/AMH都维持在一个相对较低的水平。在更年期，MIS/AMH下降到无法检测的水平(用免疫方法检测不到)。 MIS/AMH可能的临床应用包括女性卵巢储备和围绝经期的研究、颗粒细胞肿瘤的检测与治疗、早熟及晚熟的诊断、两性畸形的诊断、隐睾和无睾丸畸形的诊断、男性生殖功能的评估。

人抗缪勒氏管激素(AMH)检测试剂盒
本试剂仅供研究使用
试验原理：
抗缪勒氏管激素(AMH)试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知抗缪勒氏管激素(AMH)浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将抗缪勒氏管激素(AMH)物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中抗缪勒氏管激素(AMH)的活性浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制：
试剂盒成份96孔配置48孔配置
96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）
塑料膜板盖1块半块
标准品：1000pg/ml 1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）
空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）
标准品稀释缓冲液1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）
生物素标记的抗IFN-Α抗体1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）
亲和链酶素-HRP1瓶（12ml）1瓶（5ml）
洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）
底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）
底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）
终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）
自备材料：
1. 蒸馏水。
2. 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
样品收集、处理及保存方法：
1、血清……操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、血浆……EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液……1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆……将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。
5、保存……如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人抗缪勒氏管激素检测试剂盒 操作注意事项：
● 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
● 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
● 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
● 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
● 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
● 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
● 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
● 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人抗缪勒氏管激素检测试剂盒 操作步骤：
1. 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育45分钟。
4. 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育5分钟。避免光照。
8. 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。

原创作者：上海劲马实验设备有限公司

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