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小鼠超氧化物歧化酶ELISA试剂盒

  • 型号:Wk20348价格: 电议
  • 产地:美国 点击量:1905

产品简介: 产品名称:小鼠超氧化物歧化酶ELISA试剂盒检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法保存:2-8℃联系电话:021—60449724,13296089724样品形式:血清/血浆/细胞培养上清/其它生物液体(具体情况请咨询)保存与运输:短期4℃/长期-20℃保存应用范围:科研用检测试剂小鼠超氧化物歧化酶ELISA试剂盒操作步骤:&nbs

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产品详细

产品名称:小鼠超氧化物歧化酶ELISA试剂盒
检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法
保存:2-8℃
联系电话:021—60449724,13296089724
样品形式:血清/血浆/细胞培养上清/其它生物液体(具体情况请咨询)
保存与运输:短期4℃/长期-20℃保存
应用范围:科研用检测试剂
 1.   使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2.   根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3.   加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。
4.   甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5.   每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6.   甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7.   每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光照。
8.   取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9.   在450nm波长处测定各孔的OD值。
Assay procedure
1.Dilute and add sample:Dilute Original density Standard as follow table:
20μg/L5 Standard150μl Original density Standard+150μl Standard diluent
10μg/L4 Standard150μl 5 Standard+150μl Standard diluent
5μg/L3 Standard150μl 4 Standard+150μl Standard diluent
2.5μg/L2 Standard150μl 3 Standard +150μl Standard diluent
1.25μg/L1 Standard150μl 2 Standard +150μl Standard diluent
2.add sample:Set blank wells separately (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.
3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.
4.Configurate liquid: 30-fold wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.
5.washing:Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.
6.add enzyme:Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except  blank well. 
7.incubate:Operation with 3.
8.washing:Operation with 5.
9.color:Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃
10.Stop the reaction:Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).

原创作者:上海劲马实验设备有限公司

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