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大鼠骨保护素ELISA试剂盒价格

  • 型号:价格: 电议
  • 产地:美国 点击量:2191

产品简介: ●ELISA试剂盒,ELISPOT试剂盒产品名称: 大鼠骨保护素ELISA试剂盒价格联系电话:021—60449724,13296089724可测种属:人、大小鼠、豚鼠、兔子、猪、犬、猴、马…可测标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液规格:96T/48T中英文双版说明书提供代测含税含运费经营品牌:RD保存条件及有效期

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ELISA试剂盒ELISPOT试剂盒

产品名称: 大鼠骨保护素ELISA试剂盒价格

联系电话:021—60449724,13296089724
可测种属:人、大小鼠、豚鼠、兔子、猪、犬、猴、马…
可测标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液
规格:96T/48T 中英文双版说明书 提供代测 含税含运费
经营品牌:RD
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。

ELISA试剂盒的概念、原理、操作步骤
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继

免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,

发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。   
(一) 原理
  ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用

相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯

乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,

从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可

有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检

测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法

。   
(二)  大鼠骨保护素ELISA试剂盒 操作步骤
     方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml

。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗

3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
  2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。

然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
  3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml

。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
  4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟

  5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
  6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度

越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+"、“-"号表示。也可测O·D值

:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·

D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
  方法二 用于检测未知抗体的间接法:   
  用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次

。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤

。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)

0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法"的4、

5、6。 

原创作者:上海劲马实验设备有限公司

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