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瑞氏染液的配制方法
阅读次数:1452发布时间:2012/7/18 9:45:02
(1) 瑞氏染液配制: 瑞氏染料 830gm或1g 甲醇(AR) 500ml或600ml ○先称干燥(事先放入温箱干燥过夜)瑞氏染料放置乳钵内,用乳棒轻轻敲碎染料成粉末,再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末,加少许甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“一面镜”光泽,而无染料粉粒沉着。 ○再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮,静置片刻,将上层液体倒入一清洁储存瓶内(最好用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重复数次,至乳钵内染料及甲醇用完为止,摇匀,密封瓶口。 ○存室温暗处,储存愈久,则染料溶解、分解就越好,一般储存3个月以上为佳。 (2) 缓冲液: ●缓冲液作用: ○染色对氢离子浓度是十分敏感的,据观察pH值的改变,可使蛋白质与染料形成的化合物重新离解。 ○缓冲液须保持一定的pH使染色稳定,PBS的pH 一般在6.4~6.8, ○偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用,偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用,使pH恒定。 |