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2018最新进口ELISA试剂盒操作技术报告

阅读次数：607发布时间：2018/4/25 10:51:14

各位亲们，2018最新进口ELISA试剂盒操作技术报告出炉啦！欢迎您点击，了解更多相关内容，欢迎您关注上海劲马公司。

一、ELISA原理
1.双抗体(原)夹心法：检测抗原(体)的常见方法，应用针对抗原两个不同决定族的两种单抗分别作为固相载体和酶标抗体检测溶液中的抗原(适用于二价以上抗原，不能测小分子半抗原)。
2.间接法：检测抗体的方法，利用酶标记的抗抗体(第二抗体)检测已与固相抗原结合的抗体。
3.竞争法：检测抗原或小分子半抗原、抗体，以测抗原为例，使待测抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合，结果如待测抗原含量越多，与固相抗体结合的酶标抗原就越少，显色越浅，二者呈负相关。

二、操作指南
固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果。
1.试剂盒平衡：试剂盒中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃)，一般需在室温放置20～30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够，样品孵育时间相对缩短，ELISA反应不够充分。冬季室温低，可将试剂盒置37℃温箱20分钟。
2.样品和试剂的混匀：稀释前、后的样品必须充分混匀，所有试剂在加样前也须摇匀，以保证试验的均一性。

三、进口ELISA试剂盒操作技术之质控分析
1.人员培训内容包括：①检验项目的基本原理；②熟悉检测技巧，了解易出差错的环节及难点；熟悉检测试剂性能(包括试剂盒组成，包被片段及其组成)；③熟悉检测仪器的原理及性能;掌握数据处理的能力和质量控制知识；④某些特殊项目的检测如抗HIV等需经有关部门组织的专门培训班，考试合格后持证上岗。
2.基本介绍
① 1971年Engvall等人把免疫组化的EIA技术应用于临床检验发展为ELISA技术。
② 特点：在固相表面组装免疫活性物质形成"免疫吸附剂"。
③ 酶标记免疫活性物质，进行信号放大；
④ 有二步温育反应二次洗涤过程；
⑤ 灵敏度特异性相对较高。
⑥ 局限性：只能检测到ng水平
⑦ 精密度差(批内CV15-20%)；
⑧ ELISA检测试剂盒线性范围窄(一个数量级)；
⑨ 存在"HD-HOOK"效应。

四、进口ELISA试剂盒操作技术操作注意
1.使用干净的塑料容器配置洗涤液，使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
3.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
3.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

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原创作者：上海劲马实验设备有限公司

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