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暖冬解读:elisa试剂盒检测成功的奥秘

阅读次数：687发布时间：2017/11/29 9:09:47

想要实验结果完美自然少不了elisa试剂盒操作条件，我司业务万经理整理了一份关于elisa试剂盒操作条件，快来看看吧。

elisa试剂盒操作步骤

elisa试剂盒使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

每孔加入80ul的亲和链酶素-hrp，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。elisa试剂盒重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

每孔加入底物a、b各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

在450nm波长处测定各孔的od值。

根据elisa试剂盒试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。

（一）双抗体夹心法

（二）双位点一步法

（三）间接法测抗体

（四）竞争法

（五）捕获法测igm抗体

（六）应用亲和素和生物素

elisa试剂盒普遍用作非放射性同位素的成键化验. 在这种方法中, 通常标准配体是固定的, 通过加入溶液相受体或蛋白质来使之成键. elisa试剂盒通过加入与受体特异性反应的抗体来定量成键的受体, 而且最初抗体的量以加入第二种能显色的抗体测量. 第二种抗体能识别抗体的末端, 在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反应, 从而使溶液显色.

原创作者：上海劲马实验设备有限公司

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